輔料的質檢通常是在新一批的輔料到實驗室后統一做一次或者定期(半年或1年)做,因此質檢就包含了驗貨和質檢2個部分。由于輔料的質檢沒有一個統一的標準,一般由各實驗室自行制定,可簡可繁,這里提出一些方法供大家參考和批評指正。
1.外包裝檢查:外包裝應完整無損無污,標識清楚,檢查品名、品牌,貨號,規格、生產日期,有效期、保存條件等信息。

2.內包裝檢查:內包裝物品應與外包裝標識一致,檢查是否有破損,泄漏,內容物是否齊全,是否有相應的使用說明書等。
3.性能質檢:檢測試劑耗材是否與其性能一致,比如吸頭的準確性和氣密性等
4.污染物質檢:檢測試劑耗材是否被常規檢測項目的待檢物污染,這種污染可能是物品生產環節,也可能是運輸或實驗室的保存過程中被污染。
5.抑制物質檢:檢測試劑耗材中是否存在PCR反應的抑制物,比如核酸酶。







測試吸頭需使用經校準的移液器
(1)準確性:將n個吸頭分別吸取定量的純水稱重,重量與體積的關系按照1 g/mL換算。
(2)氣密性:取n個吸頭,吸取量程的含有1%甘油的墨水,觀察有色液體不出現在濾塞之上,液面相同為合格。
(3)防氣溶膠性能:取n個吸頭,吸取陽性核酸,反復吹吸10次,換另一個新吸頭在陰性純水中反復吹吸10次,取陰性純水作為模板進行擴增,qPCR無擴增為合格。

(4)污染物質檢:取n個吸頭,吸取陰性純水反復吹吸10次,取陰性純水作為模板進行擴增,qPCR無擴增為合格。
(5)抑制物質檢:取n個吸頭,吸取弱陽性質控物反復吹吸10次,然后進行提取;吸取RNA核酸和DNA核酸反復吹吸10次,作為模板進行擴增,qPCR擴增未被抑制為合格。
試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入,造成污染;
可以通過控制進風風量大于排風風量達到正壓效果。
核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓,以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品,可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果。
在理想情況下,PCR實驗室緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。
PCR實驗室進風由原有中央空調控制,要求將中央空調風口安裝到,且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果使用熒光PCR儀,擴增室和產物分析室可以合并。
若房間進深允許,可設PCR內部走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比走廊更有意義。
各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。
實驗室的墻體,包括頂棚,應結構牢固、氣密性好;所有陰角宜采用圓弧形線條過渡;墻體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒;地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。